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                  小鼠 (Mouse) 補(bǔ)體C3 ELISA 檢測試劑盒說明書
                  更新時間:2012-07-05   點(diǎn)擊次數(shù):1661次

                  小鼠 (Mouse) 補(bǔ)體C3 ELISA 檢測試劑盒

                            本試劑僅供研究使用      標(biāo)本:血清或血漿

                  試驗(yàn)原理:
                      C3試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知C3濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將C3和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中C3的濃度呈比例關(guān)系。
                      
                  試劑盒內(nèi)容及其配制
                  試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
                  96/48人份酶標(biāo)板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
                  塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
                  標(biāo)準(zhǔn)品:8.0g/L 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進(jìn)行稀稀
                  空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
                  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
                  生物素標(biāo)記的抗C3抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
                  親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
                  洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進(jìn)行稀釋
                  底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
                  底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
                  終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
                  標(biāo)本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型

                  自備材料
                  蒸餾水。
                  加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
                  振蕩器及磁力攪拌器等。

                  小鼠 (Mouse) 補(bǔ)體C3 ELISA 檢測試劑盒
                   

                  安全性
                  避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
                  實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
                  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

                  操作注意事項
                  試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
                  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
                  不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
                  使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
                  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
                  洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
                  底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
                  加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
                  按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

                  小鼠 (Mouse) 補(bǔ)體C3 ELISA 檢測試劑盒
                   

                  樣品收集、處理及保存方法
                  血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
                  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
                  細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
                  組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
                  保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

                  試劑的準(zhǔn)備
                  標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
                  8.0 g/L (6號標(biāo)準(zhǔn)品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
                  4.0 g/L (5號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
                  2.0 g/L (4號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
                  1.0 g/L (3號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
                  0.5 g/L (2號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
                  0.25 g/L (1號標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
                  0 g/L (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

                  洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。


                  操作步驟
                  使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
                  根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
                  加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
                  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
                  每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
                  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
                  每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
                  取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
                  在450nm波長處測定各孔的OD值。

                  6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

                  小鼠 (Mouse) 補(bǔ)體C3 ELISA 檢測試劑盒
                   

                  試劑盒性能
                  1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
                  2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
                  3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

                  結(jié) 果 判 斷 與 分 析
                  1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

                  2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的C3標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的C3含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

                  3、檢測值范圍:0-8.0g/L

                  4、敏感度: 0.01 g/LL-Arginine, monohydrochloride L-精氨酸鹽酸鹽 [1119-34-2] 100g
                  L-Arginine, monohydrochloride L-精氨酸鹽酸鹽 [1119-34-2] 500g
                  Arsenazo I 偶氮砷I / 1g
                  Arsenazo I 偶氮砷I / 5g
                  Arsenazo III 偶氮砷III [1668-00-4] 1g
                  Angiotensin acetate 醋酸血管緊張素 [20071-00-5] 100mg
                  Arg8]-Vasopressin acetate salt 精氨酸加壓素 [113-79-1] 25mg
                  L-Ascorbic acid L-抗壞血酸 [50-81-7] 100g
                  L-Ascorbic acid L-抗壞血酸 [50-81-7] 500g
                  L-Ascorbic acid L-抗壞血酸 [50-81-7] 100g
                  L-Ascorbic acid L-抗壞血酸 [50-81-7] 500g
                  L-Ascorbic acid 6-palmitate 維生素C棕櫚酸酯 [137-66-6] 25g
                  L-Asparaginase 左旋門冬酰胺酶 [9015-68-3] 500U
                  D-Asparagine, monohydrate D-天冬酰胺一水 [2058-58-4] 25g
                  DL-Asparagine, monohydrate DL-天冬酰胺一水 [3130-87-8] 100g

                   

                  上海通蔚生物科技有限公司

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                  地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號3463室

                  主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

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