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                  現(xiàn)貨人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒說明書
                  更新時間:2013-09-26   點(diǎn)擊次數(shù):1128次

                   本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷
                  人(Human)干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒使用說明書
                  檢測原理
                  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)
                  先包被干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)抗體的包被微孔中,
                  依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。
                  用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的
                  作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞
                  趨化因子(ITAC/CXCL11)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定
                  吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
                  ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
                  1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞
                  刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地
                  分離。
                  2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
                  3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
                  4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘
                  取上清。
                  5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于
                  -20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
                  自備物品
                  1. 酶標(biāo)儀(450nm)
                  2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
                  3. 37℃恒溫箱
                  操作注意事項(xiàng)
                  1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的
                  濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解
                  后再使用。2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
                  3. 濃度為0 的S0 號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明
                  書操作時樣本已經(jīng)稀釋5 倍,zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實(shí)際濃度。
                  4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
                  5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
                  試劑盒組成
                  名稱96孔配置48孔配置備注
                  微孔酶標(biāo)板12 孔×8 條12 孔×4 條無
                  標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6 管0.3mL*6 管無
                  樣本稀釋液6mL 3mL 無
                  檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無
                  20×洗滌緩沖液25mL 15mL 按說明書進(jìn)行稀釋
                  底物A 6mL 3mL 無
                  底物B 6mL 3mL 無
                  終止液6mL 3mL 無
                  封板膜2 張2 張無
                  說明書1 份1 份無
                  自封袋1 個1 個無
                  注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、150、300、600、1200、2400 pg/mL
                  試劑的準(zhǔn)備
                  20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20 稀釋,即1 份的20×洗滌緩
                  沖液加19 份的蒸餾水。
                  洗板方法
                  1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min 后甩盡
                  孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5 次。
                  2. 自動洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5 次。
                  操作步驟
                  1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封
                  袋密封放回4℃。
                  2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
                  3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不
                  加。
                  4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶
                  (HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴
                  鍋或恒溫箱溫育60min。
                  5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。
                  6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。
                  7. 每孔加入終止液50μL,15min 內(nèi),在450nm 波長處測定各孔的
                  OD 值。
                  結(jié)果判斷
                  繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)
                  OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣
                  本濃度值。
                  ELISA試劑盒試劑盒性能
                  1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值,大于等于
                  0.9900。
                  2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于10 pg/mL。
                  3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
                  4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
                  5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
                  6. 有效期:6 個月
                  免責(zé)聲明
                  1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所
                  產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
                  2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者
                  承擔(dān)。

                  上海通蔚生物科技有限公司

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                  地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號3463室

                  主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

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